中文名稱:小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒
英文名稱:Mouse SDH ELISA kit
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小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒用途:
本試劑盒僅供科研使用,定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 的含量。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 原理:
采用雙抗體夾心法測(cè)定小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 水平。用純化的小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 抗體包被微孔板,制成固相載體,實(shí)驗(yàn)時(shí)依次在微孔板中加入樣本及標(biāo)準(zhǔn)品,并加入HRP標(biāo)記的抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,再用硫酸終止反應(yīng),轉(zhuǎn)變成黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 含量呈正相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算測(cè)試樣品中小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 濃度。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒試劑盒組成
序號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
1 | 酶標(biāo)包被板 | 96孔*1可拆卸板 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml*1瓶 |
3 | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.6ml*1瓶 |
4 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 2ml*1瓶 |
5 | 生物素標(biāo)記的抗體 | 1.5ml*1瓶 |
6 | 顯色劑A液 | 6ml*1瓶 |
7 | 顯色劑B液 | 6ml*1瓶 |
8 | 終止液 | 6ml*1瓶 |
9 | 濃縮洗滌液(*30) | 20ml*1瓶 |
10 | 封板膜 | 1張 |
11 | 使用說(shuō)明書 | 1份 |
實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 洗液的配制:按1:30的比例配制洗液備用。
樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。
2. 分組:取出96孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:準(zhǔn)備小試管6 只,依次編好號(hào)碼,先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul,然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul 加入一只已編好號(hào)的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。
注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標(biāo)記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
4. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。
6. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
7. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時(shí)。
8. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙徹底拍干。
9. 顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。
10. 終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液。
11. 讀板:在450nm波長(zhǎng)讀取各孔的OD值。
注:讀板時(shí)必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時(shí)間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi),以免影響準(zhǔn)確性。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒數(shù)據(jù)計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,即為樣品的實(shí)際濃度。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免第一孔與最后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),可和所購(gòu)經(jīng)銷商聯(lián)系,如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒保存條件及有效期:
1. 試劑盒保存:2-8℃
2. 有效期:6個(gè)月
產(chǎn)品名稱: | 人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒 | |||||
產(chǎn)品英文名稱: | Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA kit | |||||
規(guī)格: | 48T/96T | |||||
檢測(cè)方法: | 雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA) | |||||
標(biāo)本: | 血清,血漿,細(xì)胞上清液,組織等 | |||||
種屬: | Human\\人 | |||||
試劑盒說(shuō)明書: | 請(qǐng)來(lái)電或者郵件索取 | |||||
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒 | ||||||
實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制: | ||||||
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘,微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。 | ||||||
2. 洗液的配制:按 1:100的比例配制洗液備用。 樣品收集、處理及保存 | ||||||
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集上清液,以1000×g離心15 | ||||||
分鐘,收集上清。 | ||||||
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞 3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到10^4-10^6/ml左右,通過(guò)反復(fù)凍融, | ||||||
使細(xì)胞破壞,并放出細(xì)胞內(nèi)成份。或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。 | ||||||
3. 血清: 在室溫 下, 血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。 | ||||||
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置 10 -20 分鐘后, | ||||||
以1000×g離心15分鐘,收集上清。 | ||||||
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集 ,以 1000×g | ||||||
離心、15 分鐘 ,收集上清。 | ||||||
6. 組織標(biāo)本:切取 組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,超聲破碎儀, | ||||||
將標(biāo)本勻漿,以2000 -300rmp離心 20 分鐘 ,收集上清進(jìn)行檢測(cè) 。 | ||||||
7. 樣品 中不能含有 NaN3,因 NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的( HRP)活性。 | ||||||
8. 保存 :如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-80 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn) | ||||||
沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高脂。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心 | ||||||
或過(guò)濾。不要在 37 ℃或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解或更高的溫度 | ||||||
加熱解或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解并確保樣品均勻地充分解凍。 | ||||||
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒 | ||||||
操作步驟 : | ||||||
1. 取出 試劑盒,室溫( 20 -25 ℃)放置 30 分鐘。 | ||||||
2. 分組: 取出 96 孔板 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù) 量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需板條,把剩余的板條繼續(xù) | ||||||
冷藏處理,分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個(gè)濃度)、空白 孔、待測(cè)樣品組。 | ||||||
注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。 | ||||||
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入100ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入100ul的 | ||||||
蒸餾水;其余微孔中加入100ul的待測(cè)樣本。 | ||||||
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入50ul 的酶標(biāo)溶液 (空白對(duì)照孔除外)。 | ||||||
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37 ℃恒溫孵育恒溫孵育 1小時(shí)。 | ||||||
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15 -30s 30s,充分清洗酶標(biāo)板5次,用吸水紙徹底拍干。 | ||||||
7. 顯色:各孔加入顯色劑A液 50ul 后,再加入顯色劑 B液 50ul 。 | ||||||
8. 終止: 25 -37 ℃下避光反應(yīng)10 -15分鐘, 加入 50 ul 終止液。 | ||||||
9. 讀板:在 450nm波長(zhǎng)讀取各孔的O 值。注: 讀板時(shí)必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡, | ||||||
讀板時(shí)間控制在終止反應(yīng)后的30 分鐘內(nèi),以免影響準(zhǔn)確性。 | ||||||
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒 | ||||||
數(shù)據(jù)計(jì)算 | ||||||
1. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:各標(biāo)準(zhǔn)品 OD 值減去底色即堅(jiān)強(qiáng)空白孔OD 值(數(shù)據(jù)處理如下),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。 | ||||||
1.1軟件處理:建議用戶使logit-log模式或四參數(shù)據(jù)處理模式( y=(a-d)/(1+(x/c)^b)+d ) | ||||||
1.2計(jì)算器或手工作圖處理:Logit-log 計(jì)算:以6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品OD 值的 Logit為縱坐標(biāo) y,以標(biāo)準(zhǔn)品的 | ||||||
濃度的 log值為橫坐標(biāo)X,繪制曲線圖。logit值計(jì)算公式如下:logit=ln(B/ B0)(1-B/ B0)手工 | ||||||
作圖:以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo),在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為 | ||||||
橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的 B/B0B為縱坐標(biāo)在 logit-log坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線(理想化時(shí)是一條直)。 | ||||||
2. 根據(jù)待測(cè)樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標(biāo)紙,查出的 | ||||||
數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是最后濃度值。 | ||||||
3.敏感度:1.0µmol/L | ||||||
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒 | ||||||
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WB實(shí)驗(yàn),蛋白表達(dá)與純化,ELISA酶聯(lián)免疫代測(cè)等 |
【中文名稱】:人山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒
【英文名稱】:Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISA Kit
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T。
【產(chǎn)品貨號(hào)】:YM-S1320。
【試劑盒成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等ELISA試劑盒檢測(cè)范圍:人、綿羊、山羊、牛、馬、小鼠、大鼠、豬、兔、其它動(dòng)物細(xì)胞因子、植物細(xì)胞因子、細(xì)胞凋亡、活性多肽、自身抗體、血栓與止血、骨代謝、肝纖維化、腫瘤、激素內(nèi)分泌、自身抗體科研Elisa檢測(cè)試劑盒。
主要用于科研方面,不用于臨床診斷?梢杂糜跈z測(cè)各種指標(biāo)。
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人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒是本產(chǎn)品的中文名稱
英文名稱:Rat Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit
試劑盒價(jià)格:聯(lián)系哈靈QQ客服或來(lái)電詢價(jià)!
試劑盒產(chǎn)地:進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)
儲(chǔ)存方式:2-8℃
售后服務(wù):技術(shù)老師全程提供ELISA實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)以及免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)。
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒哪里有賣(買)??jī)r(jià)格怎么樣?能否提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)?
回答:上海哈靈生物ELISA試劑盒研究所 批發(fā)各種試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,抗體,elisa試劑盒,實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器,價(jià)格優(yōu)惠,貨源充足,并且提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)!
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人SDH elisa試劑盒
產(chǎn)品別名:人山梨醇脫氫酶ELISA試劑盒
英文名稱:Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA KIT
包裝:96T/48T
價(jià)格:詢價(jià)(010-57269780,15311645695 在線QQ:1261299569)
ELISA關(guān)鍵步驟為以下幾點(diǎn):1、盡量用八道或者十二道移液器加樣。對(duì)于相同的試劑,經(jīng)如二抗,酶,顯色液,終止液等。2、自己的樣品,因?yàn)槊恳豢椎臉悠凡灰粯樱门艠尲佑行┞闊,如果一次的樣品比較少,而自己加樣又比較快,可以一個(gè)孔一個(gè)孔的加,但如果想一次把96或者48T的做完,可以先擺好一些PCR管或者準(zhǔn)備一個(gè)96孔細(xì)胞培養(yǎng)板。將自己的樣品先加到PCR管或者培養(yǎng)板中(此板間距與酶板板相同)。記得加一定的余量,如一次加樣是50ul,可以先加70ul。加完后再用排槍加樣,這樣可以縮短加樣時(shí)間,減小每個(gè)孔間的時(shí)間誤差。3、如果有多余的孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔可以做復(fù)孔,在自己的樣品前加一次標(biāo)準(zhǔn)品,加完樣品后再加一次標(biāo)準(zhǔn)品。如果孔不夠,那么可以將標(biāo)準(zhǔn)品放在樣品中間加。
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現(xiàn)貨批發(fā) 小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH)elisa試劑盒
中文名稱 : 小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse SDH ELISA kit
產(chǎn)品類別:小鼠酶聯(lián)免疫試劑盒 用于科研實(shí)驗(yàn) 不使用于臨床
ELISA試劑盒規(guī)格:48T/96T
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