中文名稱:人螺旋肽(HelicalPeptide)ELISA檢測試劑盒英文名稱: Human Helical Peptide elisa試劑盒
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運(yùn)輸方面:現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。
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人螺旋肽(HelicalPeptide)ELISA檢測試劑盒 江萊生物提供上萬種ELISA試劑盒,擁有完整、科學(xué)的質(zhì)量管理體系,并隨時(shí)把握科研新動(dòng)態(tài),為客戶提供更完善的產(chǎn)品線。本公司產(chǎn)品以“品質(zhì)高、產(chǎn)品全、價(jià)格優(yōu)”等優(yōu)勢占領(lǐng)市場,并深受國內(nèi)外客戶的青睬和好評(píng)。歡迎來電咨詢!人E鈣粘附分子(E-Cadherin)elisa試劑盒上海潤裕生物科技有限公司等科研產(chǎn)品,我公司ELISA試劑盒和免疫組化試劑盒產(chǎn)品質(zhì)量可靠,ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫分析試劑盒)專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)提供免費(fèi)代測服務(wù)及售后指導(dǎo)。所以生物試劑產(chǎn)品用于科研實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域,如有需要請(qǐng)直接來電或給我們留言(半個(gè)工作日內(nèi)給您回復(fù))。
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主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA試劑盒種屬齊全:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
產(chǎn)品運(yùn)輸方面:部分現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨
2、檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
3、服務(wù)承諾:工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)技術(shù)咨詢和指導(dǎo),提供來樣檢測及免費(fèi)代測服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性。
4、研究領(lǐng)域:炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、腫瘤研究、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)、傳染病、其他研究。
如果人E鈣粘附分子(E-Cadherin)ELISA試劑盒所檢測的樣本不是連續(xù)的,所以實(shí)驗(yàn)中不用的板條立即放回包裝中,密閉封口,4℃可保存1個(gè) 月。其余不用試劑應(yīng)包裝好或蓋好。在做樣本檢測前要有一個(gè)完整的計(jì)劃,如標(biāo)本編號(hào)、所測項(xiàng)目、目的等。操作時(shí)盡量使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
主要分為以下系列:
1、細(xì)胞因子檢測試劑盒
2、內(nèi)分泌檢測試劑盒
3、肝纖維化檢測試劑盒
4、心肌梗塞檢測試劑盒
5、腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒
6、自身免疫檢測試劑盒
7、優(yōu)生優(yōu)育檢測試劑盒
8、傳染病檢測試劑盒等等。
人E鈣粘附分子(E-Cadherin)ELISA試劑盒操作步驟
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。
方法二 用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
人E鈣粘附分子(E-Cadherin)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在人E鈣粘附分子(E-Cadherin)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,選擇好各項(xiàng)ELISA實(shí)驗(yàn)條件是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
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Thermosel加熱器主要是為了解決熱溶膠和高溫液體的粘度測量過程中需要比較高的溫度精確度時(shí)才能確保得到的數(shù)據(jù)的而專門設(shè)計(jì)的,Thermosel加熱器可以為客戶提供穩(wěn)定的,的樣品溫度測量環(huán)境,配合使用Brookfield粘度計(jì)本身的高精確性,使得測量結(jié)果不僅,而且重現(xiàn)性十分好。建議:測量熱熔膠和高溫液體粘度時(shí)需要有精確的高溫控制,以測量結(jié)果的性,而Thermosel加熱器可以做到這點(diǎn)。
熱熔膠和高溫液體的粘度測量的難度主要體現(xiàn)在高溫控制時(shí),對(duì)溫度要求比較高的精確度,這樣才能確保得到的數(shù)據(jù)是由意義、樣品之間的測試結(jié)果是一致的。
Brookfield的加熱器可以解決這個(gè)問題,為客戶提供穩(wěn)定的、地樣品溫度測量環(huán)境,加上其配合使用Brookfield粘度計(jì)本身具有的高精確性,這樣測量得到的結(jié)果不僅,而且重現(xiàn)性十分好。
特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn):
可控制樣品的溫度到高達(dá)300℃
可編程控制器可以設(shè)置單個(gè)溫度點(diǎn)到10個(gè)溫度設(shè)置點(diǎn),設(shè)置點(diǎn)之間的溫度梯度可以用Eheocalc軟件(DV-II+PRO和DV-III_ULTRA)來設(shè)置。
可與Brookfield標(biāo)準(zhǔn)粘度計(jì)或DV-III_ULTRA流變儀一起使用。
標(biāo)準(zhǔn)配置提供一個(gè)可以重復(fù)使用的不銹鋼盛樣器和5個(gè)一次性鋁制的盛樣器。
應(yīng)用領(lǐng)域:
熱熔膠、瀝青、石蠟、高聚物等
低粘度儀器加熱器轉(zhuǎn)子:
轉(zhuǎn)子號(hào): 樣品量: | SC4-18 8ML | SC4-31 10ML | SC4-34 10ML |
剪切率 | 1.32N | 0.34N | 0.28N |
LVDV-III | 1.2-30K | 12-300K | 24-600K |
LVDV-II | 1.5-30K | 15-300K | 30-600K |
LVDV-I | 3-10K | 30-100K | 60-200K |
LVDV-E | 3-10K | 30-100K | 60-200K |
LVT | 5-10K | 50-100K | 100-200K |
中高粘度加熱器轉(zhuǎn)子:
轉(zhuǎn)子號(hào): 樣品量: | SC4-21 8ML | SC4-27 11ML | SC4-28 12ML | SC4-29 13ML |
剪切率 | 0.93N | 0.34N | 0.28N | 0.25N |
RVDV-III | 20-500K | 100-2.5M | 200-5M | 400-10M |
RVDV-II | 25-500K | 125-2.5M | 250-5M | 500-10M |
RVDV-I | 50-170K | 250-830K | 500-1.7M | 1K-3.3M |
RVDV-E | 50-170K | 250-830K | 500-1.7M | 1K-3.3M |
RVT | 50-100K | 250-500K | 500-1M | 1K-2M |
HADV-III | 40-1M | 200-5M | 400-10M | 800-20M |
HADV-II | 50-1M | 250-5M | 500-10M | 1K-20M |
HADV-I | 100-300K | 500-1.7M | 1K-3.3M | 2K-6.7M |
HADV-E | 100-300K | 500-1.7M | 1K-3.3M | 2K-6.7M |
HAT | 100-200K | 500-1M | 1K-2M | 2K-4M |
HBDV-III | 160-4M | 800-20M | 1.6K-40M | 3.2K-80M |
HBDV-II | 200-4M | 1K-20M | 2K-40M | 4K-80M |
HBDV-I | 400-1.3M | 2K-6.7M | 4K-13.3M | 8K-26.7M |
HBDV-E | 400-1.3M | 2K-6.7M | 4K-13.3M | 8K-26.7M |
HBT | 400-800K | 2K-4M | 4K-8M | 8K-16M |
備注:M=1 million K=1 thousand N=RPM轉(zhuǎn)速
倫茨伺服控制器總代理 Lenze聯(lián)系人:李厚樂 經(jīng)理郵箱:2523353652@qq.comqq:2523353652
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供應(yīng)常見型號(hào):
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倍福beckhoff EK1101-0080 |
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倍福beckhoff EK1122-0008 |
倍福beckhoff EK1122-0080 |
倍福beckhoff EK1501 |
倍福beckhoff EK1501-0010 |
倍福beckhoff EK1501-0100 |
倍福beckhoff EK1521 |
倍福beckhoff EK1521-0010 |
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倍福beckhoff EK1310 |
倍福beckhoff EK1322 |
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倍福beckhoff EK1818 |
倍福beckhoff EK1828 |
倍福beckhoff EK1828-0010 |
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倍福beckhoff EK3100 |
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倍福beckhoff EK9300 |
倍福beckhoff EK9500 |
倍福beckhoff EK9700 |
倍福beckhoff EK1960 |
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倍福beckhoff ES1002 |
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倍福beckhoff ES1008 |
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倍福beckhoff ES1202 |
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倍福beckhoff ES1252 |
倍福beckhoff EL1252-0050 |
倍福beckhoff EL1258 |
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倍福beckhoff EL1262 |
倍福beckhoff ES1262 |
倍福beckhoff EL1262-0050 |
倍福beckhoff EL1382 |
倍福beckhoff ES1382 |
倍福beckhoff EL1502 |
倍福beckhoff ES1502 |
倍福beckhoff EL1512 |
倍福beckhoff ES1512 |
倍福beckhoff EL1702 |
倍福beckhoff ES1702 |
倍福beckhoff EL1712 |
倍福beckhoff ES1712 |
倍福beckhoff EL1722 |
倍福beckhoff ES1722 |
倍福beckhoff EL1804 |
倍福beckhoff EL1808 |
倍福beckhoff EL1809 |
倍福beckhoff EL1814 |
倍福beckhoff EL1819 |
倍福beckhoff EL1859 |
倍福beckhoff EL1862 |
倍福beckhoff EL1862-0010 |
倍福beckhoff EL1872 |
倍福beckhoff EL1889 |
倍福beckhoff EL1904 |
倍福beckhoff EL1908 |
倍福beckhoff EL2002 |
倍福beckhoff ES2002 |
倍福beckhoff EL2004 |
倍福beckhoff ES2004 |
倍福beckhoff EL2008 |
倍福beckhoff ES2008 |
倍福beckhoff EL2022 |
倍福beckhoff ES2022 |
倍福beckhoff EL2024 |
倍福beckhoff ES2024 |
倍福beckhoff EL2024-0010 |
倍福beckhoff EL2032 |
倍福beckhoff ES2032 |
倍福beckhoff EL2034 |
倍福beckhoff ES2034 |
倍福beckhoff EL2042 |
倍福beckhoff ES2042 |
倍福beckhoff EL2084 |
倍福beckhoff ES2084 |
倍福beckhoff EL2088 |
倍福beckhoff ES2088 |
倍福beckhoff EL2124 |
倍福beckhoff ES2124 |
倍福beckhoff EL2202 |
倍福beckhoff ES2202 |
倍福beckhoff EL2212 |
倍福beckhoff ES2212 |
倍福beckhoff EL2252 |
倍福beckhoff ES2252 |
倍福beckhoff EL2258 |
倍福beckhoff EL2262 |
倍福beckhoff ES2262 |
倍福beckhoff EL2502 |
倍福beckhoff ES2502 |
倍福beckhoff EL2521 |
倍福beckhoff ES2521 |
倍福beckhoff EL2521-0024 |
倍福beckhoff EL2521-0025 |
倍福beckhoff EL2521-0124 |
倍福beckhoff EL2522 |
倍福beckhoff EL2535 |
倍福beckhoff ES2535 |
倍福beckhoff EL2535-0002 |
倍福beckhoff EL2535-0050 |
倍福beckhoff EL2545 |
倍福beckhoff ES2545 |
倍福beckhoff EL2595 |
倍福beckhoff EL2602 |
倍福beckhoff ES2602 |
倍福beckhoff EL2612 |
倍福beckhoff ES2612 |
倍福beckhoff EL2622 |
倍福beckhoff ES2622 |
倍福beckhoff EL2624 |
倍福beckhoff ES2624 |
倍福beckhoff EL2652 |
倍福beckhoff ES2652 |
倍福beckhoff EL2712 |
倍福beckhoff ES2712 |
倍福beckhoff EL2722 |
倍福beckhoff ES2722 |
倍福beckhoff EL2732 |
倍福beckhoff ES2732 |
倍福beckhoff EL2784 |
倍福beckhoff EL2788 |
倍福beckhoff EL2794 |
倍福beckhoff EL2798 |
倍福beckhoff EL2808 |
倍福beckhoff EL2809 |
倍福beckhoff EL2819 |
倍福beckhoff EL2828 |
倍福beckhoff EL2872 |
倍福beckhoff EL2872-0010 |
♦ 采用原裝進(jìn)口氣體傳感器,使用壽命更長,測量結(jié)果穩(wěn)定、精確♦ 采用嵌入式32位超低功耗微處理器,響應(yīng)速度快,測量精度高,穩(wěn)定性和重復(fù)性好♦ 整機(jī)符合EMC設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn),超強(qiáng)抗電磁干擾能力,適用于各種復(fù)雜工業(yè)現(xiàn)場♦ 多種信號(hào)輸出,能同時(shí)輸出4-20mA模擬信號(hào)、RS485數(shù)字信號(hào)、無線數(shù)字信號(hào)♦ 全自動(dòng)溫度、濕度補(bǔ)償技術(shù),測量數(shù)據(jù)真實(shí)有效♦ 配備紅外遙控器,無需開蓋,使得儀器的現(xiàn)場操作更加安全、方便♦ 安裝方式靈活多變,安裝過程簡單快捷,能適用于各種安裝場所♦ 工業(yè)級(jí)彩屏顯示,圖文引導(dǎo)式軟件操作菜單,支持中英文菜單切換♦ 可選配氣體濃度單位能快速切換,自動(dòng)換算
固定式氦氣檢測儀、固定式氦氣分析儀GD800-HE適用場所:
◆石油化工、工業(yè)生產(chǎn)、冶煉鍛造、電力、煤礦、隧道工程、環(huán)境監(jiān)測、污水治理
◆生物制藥、家居環(huán)保、畜牧養(yǎng)殖、溫室培植、倉儲(chǔ)物流、釀造發(fā)酵、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)
◆消防、燃?xì)、樓宇建造、市政企業(yè)、學(xué)校實(shí)驗(yàn)室、科研中心
◆制藥、噴漆房、涂料油漆工業(yè)、塑膠烤箱等
固定式氦氣檢測儀、固定式氦氣分析儀GD800-HE技術(shù)參數(shù)
檢測氣體: | 氦氣-HE | ||
量程范圍: | 0-5/10/20/50/100%VOL等可選 | ||
檢測原理: | 熱導(dǎo)式 | ||
檢測精度: | ≤±2%FS | 分辨率: | 0.01%VOL |
檢測方式: | 自由擴(kuò)散式 | 零點(diǎn)漂移: | ≤±1%(F.S/年) |
相應(yīng)時(shí)間: | ≤20秒 | 恢復(fù)時(shí)間: | ≤20秒 |
線性誤差: | ≤±1% | 儀器顯示: | 2.0寸工業(yè)級(jí)彩屏 |
報(bào)警方式: | 聲+光報(bào)警,聲音>85分貝,光閃爍警示,聲音大小可調(diào)整 | ||
殼體材料: | 全鑄鋁外殼、噴砂氧化、電鍍絕緣漆、防爆耐腐蝕 | ||
電源: | 24VDC(12-36VDC),可選配直接連接220V電壓 | ||
數(shù)據(jù)存儲(chǔ): | 5秒存儲(chǔ)一次,可存儲(chǔ)5年以上 | ||
信號(hào)輸出: | 4-20mA電流信號(hào)輸出,可連接各種報(bào)警控制器、PLC、DCS 等各種控制系統(tǒng) | ||
RS-485數(shù)字信號(hào)輸出,連接RS232轉(zhuǎn)接卡可在電腦上存儲(chǔ)數(shù)據(jù)(選配功能) | |||
2組繼電器輸出:無源觸電容量220VAC 3A或24VDC 3A(選配功能) | |||
報(bào)警信號(hào)輸出:現(xiàn)場聲光報(bào)警,報(bào)警聲音:> 110 分貝 | |||
重量: | 1.8kg | 儀器尺寸: | 195*155*70mm(長寬高) |
防護(hù)等級(jí): | IP66 | 功耗: | ≤3W |
濕度范圍: | 10-95%RH無凝露 | 溫度范圍: | -20℃~+70℃(高溫可處理) |
執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn): | GB15322.1-2003,GB3836.1-2010,GB3836.2-2010,GB3836.4-2010 | ||
質(zhì)量保證: | 質(zhì)保一年,一年內(nèi)免費(fèi)維修,終身維護(hù) |
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中魚cGnRH水平。用純化的魚cGnRH抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入cGnRH,再與HRP標(biāo)記的cGnRH抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的cGnRH呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中魚cGnRH濃度。
魚cGnRHELISA檢測試劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(16ng/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個(gè) |
魚cGnRHELISA檢測試劑盒標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
8ng/L | 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
4ng/L | 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2ng/L | 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1ng/L | 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
0.5ng/L | 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié):
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
魚cGnRHELISA檢測試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月