Reagent | Quantity |
酶標(biāo)包被板 | 12well×8strips |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 1×0.5ml |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1×1.5ml |
酶標(biāo)試劑 | 1×6ml |
樣品稀釋液 | 1×6ml |
顯色劑A液 | 1×6ml |
顯色劑B液 | 1×6ml |
終止液 | 1×6ml |
30倍濃縮洗滌液 | 1×20ml×30flod |
說明書 | 1 |
封板膜 | 2 |
密封袋 | 1 |
比如 | Tube | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
如稀釋成 | ng/mL | 10 | 5 | 2.5 | 1.25 | 0.625 | 0.3125 |
樣本 | 回收率范圍 | 平均回收率(%) |
血清(n=5) | 86-98 | 93 |
EDTA血漿(n=5) | 91-103 | 96 |
肝素血漿(n=5) | 84-96 | 90 |
樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
血清(n=5) | 83-95% | 85-97% | 93-107% | 85-99% |
EDTA血漿(n=5) | 95-105% | 91-102% | 89-99% | 93-104% |
肝素血漿(n=5) | 87-101% | 84-98% | 91-103% | 88-96% |
四環(huán)素類(TCs)ELISA檢測(cè)試劑盒詳細(xì)資料:
四環(huán)素類(TCs)ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河糜诜涿、牛奶、組織(含水產(chǎn))中四環(huán)素、土霉素、金霉素、強(qiáng)力霉素等四環(huán)素類藥物的殘留檢測(cè)。以此監(jiān)測(cè)生產(chǎn)出的產(chǎn)品是否超出農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)
實(shí)驗(yàn)原理:應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。(3)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。(4)酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。(五)試劑盒的清洗 試驗(yàn)原理:試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。自備材料 1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。
與四環(huán)素類(TCs)ELISA測(cè)試劑盒相關(guān)的試劑盒還有以下
四環(huán)素類(TCs)ELISA檢測(cè)試劑盒
頭孢霉素 elisa試劑盒
鏈霉素ELISA試劑盒
紅霉素ELISA試劑盒
瘦肉精ELISA試劑盒
呋喃唑酮ELISA試劑盒
呋喃它酮ELISA試劑盒
本試劑僅供研究使用 標(biāo)本:血清或血漿
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)原理:
LDH 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知LDH 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將LDH 和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中LDH 的濃度呈比例關(guān)系。
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48人份酶標(biāo)板 | 1塊板(96T) | 半塊板(48T) | 即用型 |
塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 | 即用型 |
標(biāo)準(zhǔn)品:800IU/L | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按說明書進(jìn)行稀稀 |
空白對(duì)照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 |
生物素標(biāo)記的抗LDH 抗體 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
親和鏈酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 |
洗滌緩沖液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
終止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
標(biāo)本稀釋液 | 1瓶(12ml) | 1瓶(6.0ml) | 即用型 |
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)
1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
1. 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
800 IU/L | (6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
400 IU/L | (5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
200 IU/L | (4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
100 IU/L | (3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
50 IU/L | (2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
25 IU/L | (1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品) | 100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
0 IU/L | (空白對(duì)照) | 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
建議使用的實(shí)驗(yàn)方案
| 標(biāo)準(zhǔn)品濃度(IU/L) |
| ||||||||||
A | 800 | 800 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
B | 400 | 400 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
C | 200 | 200 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
D | 100 | 100 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
E | 50 | 50 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
F | 25 | 25 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
G | 0 | 0 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
H | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 | 樣品 |
局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到精確的結(jié)果。
大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測(cè)試劑盒性能
1. 靈敏度:最小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的LDH 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的LDH 含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測(cè)值范圍:0-800IU/L
4、敏感度: 1.0 IU/L
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(1)、高效、靈敏、特異的抗體;
(2)、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
(3)、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
(4)、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
(5)、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。
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一、檢測(cè)原理
本試劑盒利用安普霉素抗體與安普霉素可產(chǎn)生特異性結(jié)合的性質(zhì),先在酶標(biāo)板上預(yù)包被抗原,再加入標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)和安普霉素抗體工作液,樣本或標(biāo)準(zhǔn)品中的安普霉素藥物與包被抗原競(jìng)爭(zhēng)安普霉素抗體,最后加入底物催化顯色。此時(shí)顯色深度與標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)中安普霉素藥物的含量成反比。
二、檢測(cè)范圍
本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測(cè)產(chǎn)品,與儀器分析技術(shù)比較,能經(jīng)濟(jì)、快速地檢測(cè)出組織、肝臟、蜂蜜等樣品中安普霉素的含量。
三、注意事項(xiàng)
1、室溫低于20 ℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20~
25 ℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)出
現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象,所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3、反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚;若不慎滴漏到皮膚上,請(qǐng)盡快用水沖洗。
4、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。
5、保存試劑盒于2~8 ℃,不要冷凍,將不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對(duì)光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
6、顯色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之;0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450 nm)值小于0.5(A450nm< 0.5)時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
7、在加入底物液后,一般顯色10 min即可。若顏色較淺,可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到15 min(或更長(zhǎng)),但不得超過30 min;反之,則減短反應(yīng)時(shí)間。
8、該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25 ℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
四、貯藏條件及保存期
貯藏條件:在2~8 ℃保存試劑盒。
保存期:本試劑盒有效期為12個(gè)月。
進(jìn)口 人分泌成分(SC)elisa試劑盒,人SC Elisa檢測(cè)試劑盒
人分泌成分ELISA試劑盒
英文名稱:Human secretory component,SC ELISA KIT
主要作用:研究使用
人分泌成分ELISA試劑盒 操作注意事項(xiàng): 1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
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產(chǎn)品介紹
本試劑盒系由預(yù)包被豬流行性腹瀉病毒(PEDV)抗原的微孔板和酶標(biāo)記抗原及其他配套試劑組成,應(yīng)用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中流行性腹瀉病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí),在包被板中加入對(duì)照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后,若樣品中含有豬流行性腹瀉病毒抗體,則將與包被板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)抗原,與包被板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬流行性腹瀉病毒抗體。豬流行性腹瀉病毒抗體檢測(cè)試劑盒【儲(chǔ)存及有效期】于2~8℃避光保存,有效期為6個(gè)月。包被板開封后請(qǐng)于2~8℃避光保存,使用期限為1個(gè)月。【試劑盒組成】 1. 預(yù)包被微孔板條 96T×12. 酶標(biāo)記物 (紅蓋) 6ml×13. 樣品稀釋液 (藍(lán)蓋) 6ml×14. 30X濃縮洗滌液 (透明蓋) 20ml×15. 底物液A (白蓋) 6ml×16. 底物液B (黑蓋) 6ml×17. 終止液 (黃蓋) 6ml×18. 陽性對(duì)照 (紅蓋,已滅活) 0.5 ml×19. 陰性對(duì)照 (綠蓋,已滅活) 0.5 ml×110. 蓋板膜 2張11. 自封袋 1個(gè)12. 說明書 1份【樣品制備】1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫(25℃左右),并搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解,然后用蒸餾水或去離子水作30倍稀釋。【試驗(yàn)操作方法】1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。2.取所需用量包被微孔板條,設(shè)空白對(duì)照1孔、陰陽性對(duì)照各2孔及所需的樣品孔并編好號(hào);未用的板條盡快密封,2~8℃保存。3.陰、陽性對(duì)照孔分別加入陰、陽性對(duì)照50μl;樣品孔每孔加入樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl;空白對(duì)照孔不加。4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。6.每孔加酶標(biāo)記物50μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。7.洗滌,同步驟5。8.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(630nm作參比波長(zhǎng))測(cè)定各孔吸光值(A450)。測(cè)定應(yīng)在終止后15分鐘內(nèi)進(jìn)行。【結(jié)果判定】1.陰性對(duì)照:正常情況下,陰性對(duì)照孔平均A值≤0.1;2.陽性對(duì)照:正常情況下,陽性對(duì)照孔平均A值≥1.0;3.臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均A值+0.15;4.結(jié)果判定:樣品A450值大于臨界值,判為陽性;樣品A450值小于臨界值,判為陰性。【試驗(yàn)方法的局限性】 該試驗(yàn)僅作為定性檢測(cè)豬流行性腹瀉病毒抗體。
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FU-R1692 人磷酸果糖激酶(PFK)ELISA試劑盒 Human Phosphofructokinase,PFK ELISA KIT FU-R1693 人富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)ELISA試劑盒 Human CYR61 Cysteine-rich protein 61 ELISA Kit FU-R1694 人細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)ELISA試劑盒 Huma extracellular signal -regulated kinase,ERK ELISA Kit FU-R1695 人骨骼肌受體酪氨酸激酶(MUSK)ELISA試劑盒 Huma Musclespecific tyrosine kinase, MuSK ELISA kit FU-R1696 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(bFGFR)ELISA試劑盒 Human bFGFR ELISA Kit FU-R1697 人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒 Human FABP4 ELISA Kit FU-R1698 人肽聚糖識(shí)別蛋白(PGRP-S)ELISA試劑盒 Human PGRP-S ELISA kit FU-R1699 人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒 Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,DVD/DHVD 3 ELISA Kit FU-R1700 人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒 Human 1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG ELISA Kit FU-R1701 人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 Human 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA Kit FU-R1702 人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA試劑盒 Human 1,5-anhydroglucitol,1,5-AG ELISA Kit FU-R1703 人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒 Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit
人磷酸果糖激酶試劑盒,人PFK ELISA Kit,北京elisa價(jià)格 說明書 北京方程生物權(quán)威ELISA試劑盒供應(yīng)商,質(zhì)量,無效退款。
樣品類型 血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣品類型 檢測(cè)方法 酶聯(lián)免疫法
特 異 性 公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性交叉反應(yīng) 由于當(dāng)前的酶聯(lián)免疫科學(xué)技術(shù)和知識(shí)有限,現(xiàn)有技術(shù)不可能完成藥物檢測(cè)的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此,交叉反應(yīng)可能仍然存在 樣 本 量 50-100 μL 實(shí)驗(yàn)時(shí)間 1–4.5h 儲(chǔ)存條件 2-8°C 儲(chǔ)存方法 可以存儲(chǔ)在2 - 8°C長(zhǎng)達(dá)1個(gè)月(專家建議:4°C恒溫保存,酶免試劑盒實(shí)驗(yàn)效果更佳)。對(duì)于長(zhǎng)期存儲(chǔ),在-20°C的存儲(chǔ)。盡量保持試驗(yàn)板在密封鋁箔袋,避免潮濕 有 效 期 6 months 工作原理人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)elisa試劑盒的原理 ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。產(chǎn)品選型人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)ELISA試劑盒的類型 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要有以下幾種類型:雙抗體夾心法測(cè)抗原操作流程雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原最常用的方法,操作步驟如下:(1) 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。(2) 加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。(3) 加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。(4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。在臨床檢驗(yàn)中,此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對(duì)受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標(biāo)用的抗體最好分別取自不同種屬的動(dòng)物。如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測(cè)。 在一步法測(cè)定中,當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時(shí),過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,此時(shí)反應(yīng)后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同(參見1.3.2,圖1-4),如按常法測(cè)讀,所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量,這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)(hook effect),因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí),反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測(cè)定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)時(shí),應(yīng)注意可測(cè)范圍的最高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。 假使在被測(cè)分子的不同位點(diǎn)上含有多個(gè)相同的決定簇,例如HBsAg的a決定簇,也可用針對(duì)此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測(cè)中應(yīng)注意亞型問題,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個(gè)亞型,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性,這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問題。 雙抗體夾心法測(cè)抗原的另一注意點(diǎn)是類風(fēng)濕因子(RF)的干擾。RF是一種自身抗體,多為IgM型,能和多種動(dòng)物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗體夾心法檢測(cè)的血清標(biāo)本中如含有RF,它可充當(dāng)抗原成份,同時(shí)與固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合,表現(xiàn)出假陽性反應(yīng)。采用F(ab')或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑,由于去除了Fc段,從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,已被列為這類試劑的一項(xiàng)考核指標(biāo)。 雙抗體夾心法適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原,但不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原,因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。應(yīng)用領(lǐng)域人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)ELISA試劑盒的試劑準(zhǔn)備按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。 ELISA 中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH 計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。試劑的準(zhǔn)備之加樣在 ELISA 中一般有3 次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定(如間接法 ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩 1 分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。